SN/T 4684-2016 英語 PDF (SNT4684-2016)

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SN/T 4684-2016: 輸出入化粧品中の Burkholderia cepacia の検出
シリアル番号 4684-2016
SN
出入国検査および検疫産業
中華人民共和国の標準
化粧品中のBurkholderia cepaciaの検出
輸入と輸出
発行日: 2016年12月12日
実施日: 2017年7月1日
発行元：中華人民共和国国家質量検査検疫総局
目次
序文…3
1 範囲 ... 4
2 規範的参照 ... 4
3 設備と資材 ... 4
4 培地と試薬 ... 5
5 検査手順 ... 5
6 操作手順 ... 6
7 結果報告 ... 8
8 廃棄物処理 ... 8
付録A（規定）培地および試薬...9
化粧品中のBurkholderia cepaciaの検出
輸入と輸出
1 範囲
この規格は化粧品中のBurkholderia cepaciaの検出方法を規定している。
輸入と輸出。
この規格は化粧品中のBurkholderia cepaciaの定性検出に適用される。
輸入および輸出用。
2 規範的参照
この文書の申請には以下の文書が必須です。
文書の場合、指定された日付のバージョンのみがこの文書に適用されます。
日付のない文書については、最新版（すべての修正を含む）のみが適用されます。
この規格に適用可能です。
GB 7918.1 化粧品の微生物学的検査の標準方法 -
一般的なルール
GB 19489 実験室 - バイオセーフティに関する一般要求事項
3 設備と資材
微生物学における日常的な滅菌および培養装置に加えて
実験室、その他の設備および材料は次のとおりです。
3.1 恒温インキュベーター：30℃±1℃、32℃±1℃、36℃±1℃。
3.2 ホモジナイザー
3.3 発振器
3.4 光学顕微鏡
3.5 バランス：感度0.1g。
3.6 滅菌ピペット：1mL、10mL（0.1mL目盛り付き）、またはマイクロピペットとチップ。
3.7 滅菌ペトリ皿：直径90mm（または市販の使い捨て滅菌ペトリ皿）
皿）。
3.8 接種ループ：直径3mm。
3.9 均質化バッグまたは均質化ボトル。
3.10 自動微生物生化学同定システム。
4 培地と試薬
4.1 ポリミキシンBを含むSCDLP濃縮溶液：A.1を参照。
4.2 ゲンタマイシンを含むBCSA濃縮溶液：A.2を参照。
4.3 ポリミキシンBおよびゲンタマイシンを含むBCSA寒天培地：A.3を参照。
4.4 ポリミキシンBおよびゲンタマイシンを含むマッコンキー寒天培地（クリスタルバイオレットなし）:
A.4を参照してください。
4.5 グラム染色: A.5 を参照。
4.6 オキシダーゼ試験用試薬：A.6を参照。
4.7 グルコース酸化/発酵管：A.7を参照。
4.8 スクロース酸化培地: A.8を参照。
4.9 サイモンクエン酸培地: A.9 を参照。
4.10 エスクリン培地: A.10 を参照。
4.11 生化学同定キット。
5 検査手順
Burkholderia cepaciaの検査手順については図1を参照してください。
6.3.1 初期スクリーニング
選択寒天培地から5つ以上の典型的なコロニーまたは疑わしいコロニーを採取します。接種します。
同じ菌株を2つのグルコース酸化/発酵チューブに入れ、そのうち1つは密封する
滅菌した液体パラフィンで密封し、もう1つは密封しない。36℃±1℃で培養する。
24時間培養します。両方が黄色に変色した場合はブドウ糖発酵型です。しかし、
パラフィンなしのチューブは黄色に変わりますが、パラフィン入りのチューブは色が変わりません。
それはグルコース酸化型です。同時に、線を引いて栄養素で精製します
寒天培地で培養し、36℃±1℃で24時間培養する。酸化された細胞株の純粋培養物を選択する。
グルコースの形態（パラフィンチューブを加えると黄色に変わりませんが、
パラフィンチューブを追加せずに、識別を続けます。
6.3.2 グラム染色
疑わしいコロニーの標本を採取し、グラム染色を行う。
顕微鏡的に見ると、Burkholderia cepacia はグラム陰性の非桿菌です。
6.3.3 オキシダーゼ試験
ガラス棒または使い捨ての接種針を使用して、特徴的なコロニーを 1 つ選びます。
それをオキシダーゼ試薬で湿らせたろ紙プレートに広げます。
セパシアは遅延酸化酵素（紫、紫または濃い青）陽性であり、反応時間は
約2分～10分程度です。
注意: 実験ではニッケル/クロム材料を絶対に使用しないでください。
6.3.4 カタラーゼ試験
ガラス棒または使い捨ての接種針を使用して、特徴的なコロニーを 1 つ選びます。
それをきれいな試験管に入れ、3%過酸化水素溶液2mL（先ほど調製したもの）を加えます。
使用前に滴下してください。泡の発生を観察してください。Burkholderia cepacia
ガスがゆっくりと発生し、1 秒後に泡がゆっくりと現れます。
6.3.5 ショ糖の酸化
疑わしいコロニーを採取し、ショ糖酸化培地に接種する。
36℃±1℃で24時間培養する。培養液が黄色に変色した場合は陽性、青色に変色した場合は陰性である。
陰性。Burkholderia cepaciaは陽性。
6.3.6 クエン酸の利用
疑わしいコロニーを採取し、サイモンのクエン酸培地に接種する。
36℃±1℃で24時間培養する。培地が青色に変色した場合は陽性、薄緑色の場合は陰性である。
陰性です。Burkholderia cepacia は陽性です。
6.3.7 エスクリンの利用
疑わしいコロニーを採取し、エスクリン培地に接種する。30℃±で培養する。