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SN/T 4684-2016: 수입 및 수출용 화장품에서의 Burkholderia cepacia의 결정
일련번호 4684-2016
스엔
출입국 검사 및 검역 산업
중화인민공화국 표준
화장품에서의 Burkholderia cepacia의 결정
수입 및 수출
발행일: 2016년 12월 12일
구현일: 2017년 7월 1일
발행처: 중화인민공화국 품질검사검역총국
목차
서문 ... 3
1 범위 ... 4
2 규범적 참조 ... 4
3 장비 및 자재 ... 4
4 미디어 및 시약 ... 5
5 검사 절차 ... 5
6 작업 절차 ... 6
7 결과 보고서 ... 8
8 폐기물 처리 ... 8
부록 A (규범) 매체 및 시약 ... 9
화장품에서의 Burkholderia cepacia의 결정
수입 및 수출
1 범위
본 표준은 화장품에서 Burkholderia cepacia의 검출 방법을 규정합니다.
수입 및 수출.
본 표준은 화장품에서 Burkholderia cepacia의 정성적 검출에 적용됩니다.
수입 및 수출용.
2 규범적 참조
다음 문서는 이 문서의 적용에 필수적입니다. 날짜가 지정된 문서의 경우
문서의 경우, 표시된 날짜가 있는 버전만 이 문서에 적용됩니다.
날짜가 없는 문서의 경우 최신 버전(모든 수정 사항 포함)만 해당됩니다.
이 표준에 적용됩니다.
GB 7918.1 화장품에 대한 미생물학적 검사의 표준 방법 -
일반 규칙
GB 19489 실험실 - 생물안전에 대한 일반 요구 사항
3 장비 및 재료
미생물학 분야의 일상적인 살균 및 배양 장비 외에도
실험실, 기타 장비 및 재료는 다음과 같습니다.
3.1 일정 온도 인큐베이터: 30 °C ± 1 °C, 32 °C ± 1 °C, 36 °C ± 1 °C.
3.2 균질화기.
3.3 발진기.
3.4 광학현미경.
3.5 저울: 감도 0.1g.
3.6 멸균 피펫: 1 mL, 10 mL(0.1 mL 단위) 또는 미세피펫 및 팁.
3.7 멸균 페트리 접시: 직경 90mm(또는 기타 상업용 일회용 멸균 페트리 접시)
접시).
3.8 접종 루프: 직경 3 mm.
3.9 균질화백 또는 균질화병.
3.10 자동 미생물 생화학적 식별 시스템.
4. 미디어 및 시약
4.1 폴리믹신 B를 함유한 SCDLP 농축 용액: A.1 참조.
4.2 젠타마이신을 함유한 BCSA 농축 용액: A.2 참조.
4.3 폴리믹신 B와 겐타마이신을 함유한 BCSA 아가: A.3 참조.
4.4 폴리믹신 B와 젠타마이신(크리스탈 바이올렛 없음)을 함유한 맥콘키 아가:
A.4를 참조하세요.
4.5그램 염색: A.5 참조.
4.6 산화효소 시험용 시약: A.6 참조.
4.7 포도당 산화/발효관: A.7 참조.
4.8 자당 산화 매체: A.8 참조.
4.9 Simon's citrate medium: A.9 참조.
4.10 Esculin 배지: A.10 참조.
4.11 생화학적 식별 키트.
5. 검사 절차
Burkholderia cepacia의 검사 절차는 그림 1을 참조하세요.
6.3.1 초기 스크리닝
선택적 아가 플레이트에서 5개 이상의 일반적이거나 의심스러운 콜로니를 선택합니다. 접종
동일한 균주를 두 개의 포도당 산화/발효 튜브로 옮기고 그 중 하나는 밀봉합니다.
멸균된 액상 파라핀으로, 다른 하나는 밀봉하지 않은 상태로 36°C ± 1°C에서 배양합니다.
24시간 동안. 둘 다 노랗게 변하면 포도당 발효형입니다. 그러나
파라핀이 없는 튜브는 노랗게 변하지만 파라핀이 있는 튜브는 색이 변하지 않습니다.
포도당 산화형입니다. 동시에 선을 표시하고 영양소에서 정화합니다.
아가 플레이트. 36 °C ± 1 °C에서 24시간 동안 배양합니다. 산화된 순수 배양물을 선택합니다.
포도당 형태(파라핀 튜브를 첨가해도 노란색으로 변하지 않음; 파라핀 튜브를 첨가하면 노란색으로 변함)
파라핀 튜브를 넣지 않고) 식별을 계속합니다.
6.3.2 그람 염색
의심스러운 집락의 얼룩을 골라 그람 염색을 수행합니다. 관찰되면
현미경적으로 볼 때, Burkholderia cepacia는 그람 음성 비간균입니다.
6.3.3 산화효소 시험
유리 막대나 일회용 접종 바늘을 사용해 특징적인 단일 군집을 골라냅니다.
산화효소 시약으로 적신 여과지 판에 펴 바릅니다.
cepacia는 지연된 산화효소(보라색, 보라색 또는 진한 파란색)에 대해 양성 반응을 보입니다. 반응 시간
약 2분 ~ 10분 정도 걸립니다.
참고사항: 실험에서는 니켈/크롬 물질을 사용하지 마세요.
6.3.4 카탈라제 시험
유리 막대나 일회용 접종 바늘을 사용해 특징적인 단일 군집을 골라냅니다.
깨끗한 시험관에 넣고 3% 과산화수소 용액 2mL(방금 준비)을 첨가합니다.
사용 전) 한 방울 떨어뜨립니다. 거품이 생성되는 것을 관찰합니다. Burkholderia cepacia
가스가 천천히 생성되고, 거품은 1초 후에 천천히 나타납니다.
6.3.5 자당의 산화
의심스러운 콜로니를 골라서 자당 산화 배지에 접종합니다.
36 °C ± 1 °C에서 24시간 동안 배양합니다. 배양액이 노란색으로 변하면 양성이고 파란색으로 변하면
음성. Burkholderia cepacia는 양성입니다.
6.3.6 시트르산의 활용
의심스러운 콜로니를 골라 Simon's citrate 배지에 접종합니다.
36 °C ± 1 °C에서 24시간 동안. 배지가 파란색으로 변하면 양성이고, 연한 녹색이면 양성입니다.
음성입니다. Burkholderia cepacia는 양성입니다.
6.3.7 에스쿨린의 활용
의심스러운 콜로니를 골라 에스쿨린 배지에 접종합니다. 30°C±에서 배양합니다.