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SN/T 5706-2023: (화장품용 미생물 검사 방법 대장균 검사)
일련번호 5706-2023
스엔
출입국 검사 및 검역 산업
중화인민공화국 표준
ICS 71.100.70
CCS Y 42
화장품 미생물학 - 대장균 검출
발행일: 2023년 12월 29일
구현일: 2024년 7월 1일
발행처: 중화인민공화국 세관 총국
목차
서문 ... 3
1 범위 ... 4
2 규범적 참조 ... 4
3 용어 및 정의 ... 4
4 방법 요약 ... 4
5 장비 및 자재 ... 4
6 배양배지 및 시약 ... 5
7 검사 절차 ... 5
8 결과 보고서 ... 6
부록 A (규범) 주요 배양 매체 및 시약 ... 7
화장품 미생물학 - 대장균 검출
1 범위
본 문서에서는 화장품에 함유된 대장균에 대한 정성적 시험 방법을 설명합니다.
본 문서는 화장품에서의 대장균 시험에 적용됩니다.
2 규범적 참조
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SN/T 5075 미생물 검사를 위한 샘플 준비 사양
화장품
3 용어 및 정의
이 문서에서는 정의할 필요가 있는 용어나 정의가 없습니다.
4 방법 요약
이 방법은 대장균의 β-글루쿠로니다아제 활성을 이용하는데,
5-브로모-4-클로로-3-인돌-β-D-글루쿠로나이드를 분해하여 청록색 집락을 형성합니다.
정성적 테스트를 위해 트립신 담즙산 X-글루쿠로나이드 한천 평판 배지에서.
참고: 이 방법은 소수의 β-glucuronidase 음성 Escherichia에 적용할 수 없습니다.
대장균(예: O157)
5 장비 및 재료
미생물학의 통상적인 살균 및 배양 장비 외에도
실험실, 기타 장비 및 재료는 다음과 같습니다.
5.1 일정 온도 배양기: 36 °C ± 1 °C.
5.2 일정 온도 장치: 48 °C ± 2 °C.
5.3 냉장고: 2 °C ~ 8 °C.
5.4 균질화기 또는 유화 분산기(속도 1000 r/min 이상).
5.5 전자저울: 감도 0.1g.
5.6 멸균 원뿔 플라스크: 250 mL 또는 300 mL.
5.7 멸균 피펫: 10 mL (0.1 mL 눈금 포함).
5.8 멸균 배양접시: 직경 90mm.
5.9 멸균 균질화 백 또는 균질화 컵.
5.10 멸균 접종 루프: 10 μL(직경 약 3 mm).
5.11 pH 미터 또는 정밀 pH 시험지.
5.12 품질관리 균주: Escherichia coli ATCC25922 또는 CGMCC 1.2385 또는
양성 대조군으로서 동등한 균주; Citrobacter freundii ATCC 43864 또는 CICC 10296
또는 동등한 균주를 음성 대조군으로 사용합니다.
6. 배양배지 및 시약
6.1 대두 카제인 레시틴 트윈 80(SCDLP) 액체 배양 배지:
가.1.
6.2 트립톤 담즙 X-글루쿠로나이드(TBX) 한천: A.2에 따름.
7 검사 절차
7.1 화장품의 대장균 검사 절차
화장품 내 대장균 검사 절차는 그림 1과 같다.
부록 A
(규범적)
주배지 및 시약
A.1 대두 카제인 레시틴 트윈 80(SCDLP) 액체배지
A.1.1 성분
카제인 펩톤 : 17.0g
대두단백펩톤 : 3.0g
염화나트륨 : 5.0g
인산수소칼륨 : 2.5g
포도당 : 2.5g
레시틴 : 1.0g
트윈 80: 7.0g
증류수 : 1000mL
A.1.2 제조 방법
먼저 레시틴을 소량의 증류수에 가열하여 녹인 다음,
기타 성분. 가열하여 녹입니다. 병당 90ml. 121 °C에서 15분간 살균합니다.
진동은 침전된 Tween 80을 혼합하기 위해 수행되어야 합니다.
바닥층을 철저히 씻습니다. 약 25°C로 식혀서 사용할 준비를 합니다. pH는
25 °C에서 멸균된 배양배지는 7.2 ± 0.2입니다.
A.2 트립신 담즙염 X-글루쿠로니드(TBX) 한천
A.2.1 성분
트립신 : 20.0g
담즙산 3호 : 1.5g
5-브로모-4-클로로-3-인돌-D-글루쿠로나이드(BCIG): 75.0mg
아가 : 8.0g ~ 18.0g
증류수 : 1000mL
A.2.2 준비