YY/T 1497-2016 PDF en français (YYT1497-2016)

Livraison : 3 secondes. Télécharger le vrai PDF + Facture.
Obtenez un DEVIS en 1 minute : Cliquez sur YY/T 1497-2016
Versions historiques : YY/T 1497-2016
Aperçu True-PDF (Recharger/Défiler si vide)

YY/T 1497-2016 : Méthode d'essai d'évaluation de l'efficacité de filtration virale (VFE) des matériaux des masques de protection médicale - Méthode d'essai utilisant le bactériophage Phi-X174
AA/T 1497-2016
NORME DE L'INDUSTRIE PHARMACEUTIQUE
DE LA RÉPUBLIQUE POPULAIRE DE CHINE
ICS 11.140
C 48
Méthode d'essai d'évaluation pour la filtration virale
Efficacité (VFE) du masque de protection faciale médicale
Matériaux – Méthode d'essai utilisant le bactériophage Phi-X174
PUBLIÉ LE : 29 JUILLET 2016
Mis en œuvre le : 1er juin 2017
Publié par : China Food and Drug Administration
Table des matières
Avant-propos ... 3
1 Portée ... 4
2 Références normatives ... 4
3 Termes et définitions ... 4
4 Méthodes d'essai ... 5
5 Calcul des résultats ... 11
6 Rapport d'essai ... 11
Bibliographie ... 13
Méthode d'essai d'évaluation pour la filtration virale
Efficacité (VFE) du masque de protection faciale médicale
Matériaux – Méthode d'essai utilisant le bactériophage Phi-X174
1 Portée
Cette norme stipule la méthode d'utilisation de la suspension de bactériophages Phi-X174
liquide comme microbe de substitution pour tester l'efficacité de filtration virale (VFE) des médicaments
masques de protection ou matériaux pour masques faciaux.
La présente norme s'applique aux masques de protection médicale ou aux matériaux des masques faciaux.
qui ont des exigences pour l'évaluation de l'efficacité de filtration virale (EFV).
2 Références normatives
Les documents suivants sont indispensables à l'application du présent document.
termes de référence avec une date spécifiée, seules les versions avec une date spécifiée sont
applicable au présent document. En ce qui concerne les références sans date spécifiée, la dernière
version (y compris toutes les modifications) est applicable au présent document.
GB/T 6682-2008 Eau destinée à l'analyse en laboratoire - Spécifications et méthodes d'essai
3 Termes et définitions
Les termes et définitions suivants s’appliquent au présent document.
3.1 Virus
Le virus désigne les micro-organismes infectieux qui n'ont pas de système métabolique indépendant.
et ne peut se répliquer que dans des cellules hôtes vivantes.
3.2 Bactériophage
Le bactériophage fait référence à un type de virus qui peut infecter les bactéries.
REMARQUE : dans cette méthode de test, le bactériophage fait référence à Phi-X174. Phi-X174 n'est pas pathogène
virus aux êtres humains, mais il peut être utilisé pour imiter les virus pathogènes pour l'homme
êtres.
3.3 Lyse
La lyse fait référence à la lyse ou à la destruction de cellules bactériennes entières.
REMARQUE : dans cette méthode de test, la lyse d'Escherichia coli (en tant que cellule hôte) est provoquée par Phi-X174
invasion.
3.4 Plaque
La plaque fait référence à une zone clairement visible théoriquement (virologie) formée par un seul élément vivant
infection virale et lyse des cellules hôtes.
REMARQUE : dans cette méthode de test, la plaque fait référence à une zone clairement visible dans les colonies d'E.coli
C sur la couche d'agar. Théoriquement parlant, c'est le résultat d'un seul Phi-
Infection et lyse des bactéries par le gène X174.
3.5 Unité de formation de plaque
PFU
L'unité de formation de plaque fait référence aux virions produisant des plaques par l'infection et la lyse
de bactéries sur la couche supérieure de l'agar.
3.6 Microbe de substitution
Le microbe de substitution fait référence au microbe mode utilisé pour imiter les microbes pathogènes.
REMARQUE : dans cette méthode de test, le microbe de substitution fait référence au bactériophage Phi-X174.
3.7 Efficacité de la filtration virale
VFE
L'efficacité de filtration virale fait référence au pourcentage de particules virales en suspension
filtré par échantillon d'essai à un débit spécifié.
4 méthodes d'essai
4.1 Principe du test
Faire passer un aérosol (avec une certaine concentration de virus) à travers un échantillon à une certaine
débit. Grâce à la détermination du nombre de virus dans l'aérosol avant et
après avoir pénétré l'échantillon, calculez l'efficacité de filtration virale de l'échantillon.
4.2 Instruments et réactifs de test
4.2.1 Échantillonneur
Échantillonneur d'impact liquide AGI-30 (2 échantillonneurs dans chaque canal), capable de supporter une
impact de débit maximal de 12,5 L/min.
4.2.4.1 La formule du bouillon nutritif de bactériophages (Phi-X174) est la suivante :
Tryptone 8 g
Chlorure de potassium 5 g
Chlorure de calcium 0,2 g
Ajouter de l'eau jusqu'à 1 000 ml
À 121 °C, après avoir effectué une stérilisation à la vapeur sous pression pendant 20 min, la valeur du pH est de 7,3 ±
0,2.
4.2.4.2 La formule de la couche inférieure d’agar est la suivante :
Agar-agar 15 g
Bouillon nutritif 8 g
Chlorure de potassium 5 g
Chlorure de calcium 0,2 g
Ajouter de l'eau jusqu'à 1 000 ml
À 121 °C, après avoir effectué une stérilisation à la vapeur sous pression pendant 20 min, la valeur du pH est de 7,3 ±
0,2.
4.2.4.3 La formule de la couche supérieure d’agar est la suivante :
Agar-agar 7g
Bouillon nutritif 8 g
Chlorure de potassium 5 g
Chlorure de calcium 0,2 g
Ajouter de l'eau jusqu'à 1 000 ml
À 121 °C, après avoir effectué une stérilisation à la vapeur sous pression pendant 20 min, la valeur du pH est de 7,3 ±
0,2.
4.2.4.4 0,1 % d’eau peptonée stérile.
4.2.4.5 Bactériophage Phi-X174 (ATCC 13706-B1), dont la concentration doit être au moins
être 1,0  108 PFU/mL.
4.2.4.6 Escherichia coli (ATCC 13706).
h) Utiliser de l'eau peptonée stérile à 0,1 % pour diluer la solution de culture de bactériophages
la concentration requise pour les tests, afin de préparer le bactériophage
liquide de suspension difficile.
4.4.2 Procédures d'essai
Ajoutez une quantité appropriée de liquide de suspension stimulant les bactériophages pour la détection dans
le récipient de liquide du générateur d'aérosol. La concentration de bactériophage est
contrôlée à environ 1,0  108 PFU/mL par la méthode décrite en 4.4.1.
Avant chaque test, utilisez de l'air purifié pour remplir tout le système pendant environ 45 s, afin de
équilibrer le canal d'air. Ensuite, activez le générateur d'aérosol ; réglez l'heure de livraison
le liquide de suspension des bactériophages dans l'atomiseur doit être de 1 min ; régler le temps de fonctionnement de l'air
pression et l'échantillonneur doit être de 2 min. Ajoutez respectivement 20 ml de peptone stérile à 0,1 %
eau aux deux échantillonneurs à impact liquide AGI-30 pour recueillir l'aérosol de bactériophage ;
solutions de test du groupe échantillon et du groupe témoin positif. Le témoin positif
la valeur de l'échantillonneur est calculée conformément à la méthode décrite au point 5.1 ; elle ne doit pas être
inférieure à 106 PFU, sinon, la concentration de bactériophage doit être ajustée.
Répétez respectivement le test du groupe échantillon et du groupe témoin positif pendant 3
fois.
4.4.3 Test quantitatif des solutions d'essai
Effectuer une dilution en gradient de la solution d'essai dans le groupe d'échantillons à 10-3 ;
dilution en gradient de la solution d'essai dans le groupe témoin positif à 10-7. Adopter le
procédure suivante pour tester quantitativement le nombre de bactériophages dans le test
solution (obtenue en 4.4.2) après la dilution :
a) Transférer 2,5 ml de la couche supérieure stérile fondue du milieu de culture gélosé dans un
tube à essai stérilisé ; maintenir la température de la couche supérieure de la culture d'agar
milieu à (45 ± 2) °C;
b) Retirez le tube à essai contenant la couche supérieure du milieu de culture gélosé
loin de la source de chaleur ; ajouter rapidement 0,5 ml de la solution d'essai diluée,
afin de préparer des tubes d’inoculation ;
c) Ajouter 100 μL de culture d'Escherichia coli, qui a été placée pendant la nuit, à
chaque tube d’inoculation ;
d) Mélanger soigneusement le tube à essai ; le verser sur la surface de la plaque du fond
couche de milieu de culture gélosé ;
e) En ce qui concerne la solution d’essai recueillie à partir de chaque échantillon d’essai et de chaque échantillon de contrôle,
préparer 2 plaques (diamètre de la plaque : 90 mm) ;
f) Solidifier l'agar-agar ; le cultiver à (36 ± 1) °C, jusqu'à ce que la plaque soit clairement visible à l'œil nu.
l'œil nu est généré (généralement, environ 3 h ~ 4 h) ;